HB101 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品標(biāo)簽：

Stbl3；Stbl2；HB101；Stable；Direct repeats 正向重復(fù)片段；Retroviral sequences 逆轉(zhuǎn)錄病毒序列；

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產(chǎn)品組分：

菌株描述

HB101菌株是大腸桿菌K12×B的雜交菌株，也是Stbl3的原始菌株。菌株含recA13突變，能有效抑制長(zhǎng)末端重復(fù)片段的重組，降低了錯(cuò)誤重組的頻率。含hsdS20(rB^- mB^-)限制缺陷基因型，能阻止內(nèi)源性限制酶對(duì)克隆DNA的切割，增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性。但不含endA1突變，其編碼的核酸內(nèi)切酶I可能降解克隆DNA，因此質(zhì)粒提取過(guò)程中盡量使用高純質(zhì)粒提取試劑盒或經(jīng)蛋白液處理以去除酶污染的干擾。此菌株攜帶鏈霉素抗性。菌株不含lacZ?M15，無(wú)法提供來(lái)自pUC或類似載體上β-半乳糖苷酶基因的α-互補(bǔ)序列，因此不能進(jìn)行藍(lán)白斑篩選。HB101菌株適用于克隆、亞克隆和放大應(yīng)用。適用于不需要藍(lán)白斑篩選的載體。

HB101菌株基因型：F^- mcrB mrr hsdS20(rB^- mB^-) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20((str^R) glnV44 λ^-

產(chǎn)品描述

本品是HB101菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率＞>5×10⁸ cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存幾個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。

注意事項(xiàng)

1）   感受態(tài)細(xì)胞必須用干冰運(yùn)輸。感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在-80℃保存，不可反復(fù)凍融且放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)減低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。

2）   zui號(hào)在冰上融化感受態(tài)細(xì)胞。

3）   轉(zhuǎn)化高濃度質(zhì)粒或高效連接產(chǎn)物需相應(yīng)減少zui終涂板的菌量。

4）   進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時(shí)，需在相應(yīng)溫度及無(wú)菌條件下進(jìn)行。

5）   為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功，可保留部分連接反應(yīng)液以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到zui低。

6）   產(chǎn)品包裝內(nèi)含質(zhì)粒pUC19 DNA(10 pg/μl)，供對(duì)照實(shí)驗(yàn)用。

7）   為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在無(wú)菌條件的標(biāo)準(zhǔn)下進(jìn)行】【詳見(jiàn)懋康MKBio整理】

附表1 固體和液體LB培養(yǎng)基配方

附表2 固體和液體2-YT培養(yǎng)基配方

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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HB101大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞（熱激法）HB101大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞（熱激法）?